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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法

更新時(shí)間：2020-08-18   點(diǎn)擊次數(shù)：1527次
 　　elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說(shuō)你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定，樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L，取100mL被測(cè)水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品，測(cè)定時(shí)忽略體積變化，如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L，則認(rèn)為回收率為99%。
　　接下來(lái)小編為您一起了解下ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)原因如下：
　　a)可能原因：加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
　　解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密。
　　重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與在次接近；
　　重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
　　b)可能原因：加樣過(guò)快，孔間發(fā)生污染；
　　解決方法：重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；加樣不要過(guò)快。
　　c)可能原因：加錯(cuò)樣本；
　　解決方法：檢查記錄和試劑，是否加錯(cuò)樣本。
　　d)可能原因：加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁上部非包被區(qū)；
　　解決方法：加樣槍頭不要貼壁。
　　e)可能原因：不同批號(hào)試劑盒中組分混用；
　　解決方法：不同批號(hào)試劑盒中組分不可混用。
　　f)可能原因：溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致；
　　解決方法：檢查時(shí)間是否一致。
　　g)可能原因：孔內(nèi)污染雜物；
　　解決方法：離心樣品，排除雜物。
　　h)可能原因：試劑/樣品沒(méi)有混勻；
　　解決方法：充分混勻樣品和試劑。
　　i)可能原因：血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)等。
　　解決方法：待血清標(biāo)本*凝固后做試驗(yàn)。