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美國(guó)TSZ試劑盒優(yōu)劣因測(cè)試不同而論

更新時(shí)間：2015-01-29   點(diǎn)擊次數(shù)：1760次
 　　美國(guó)TSZ試劑盒隨著對(duì)某些帶有特定突變的惡性腫瘤的了解，科學(xué)家們制備了能特異性識(shí)別這些突變的T細(xì)胞，并接著將它們灌注回病人體內(nèi)以產(chǎn)生一種抗腫瘤免疫反應(yīng)。盡管在黑色素瘤中已經(jīng)看到了治療的裨益，但人類(lèi)免疫系統(tǒng)是否能發(fā)起一種針對(duì)上皮細(xì)胞癌的對(duì)突變具有特異性的T細(xì)胞反應(yīng)則仍不清楚；上皮細(xì)胞癌常常比黑色素瘤所含的突變要少美國(guó)TSZ試劑盒一般均配以特殊儀器。為比較不同固相在某一測(cè)定中的優(yōu)劣，可應(yīng)用如下的試驗(yàn)：用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本，將它們進(jìn)行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的美國(guó)TSZ試劑盒操縱步驟進(jìn)行測(cè)定，然后比較結(jié)果。這些T細(xì)胞對(duì)某罹患被稱(chēng)為膽管癌的上皮細(xì)胞癌患者的腫瘤所表達(dá)的一個(gè)突變基因具有特異性；該患者的膽管癌已經(jīng)擴(kuò)散到了肝與肺。
　　1.固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
　　2.美國(guó)TSZ試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。
　　3.酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接美國(guó)TSZ試劑盒法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。
　　4.酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色?！　∽⒁馐马?xiàng)
　　1．美國(guó)TSZ試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
　　2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
　　3．美國(guó)TSZ試劑盒各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
　　4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如美國(guó)TSZ試劑盒標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
　　5．美國(guó)TSZ試劑盒封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
　　6．底物請(qǐng)避光保存。
　　7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
　　8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
　　9．本美國(guó)TSZ試劑盒不同批號(hào)組分不得混用。
　　10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
     美國(guó)TSZ試劑盒將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，美國(guó)TSZ試劑盒每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。